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Journal of the Korean Chemical Society (JKCS)

ISSN 1017-2548(Print)
ISSN 2234-8530(Online)
Volume 52, Number 3
JKCSEZ 52(3)
June 20, 2008 

 
Title
Detection of Mycobacterium Tuberculosis by Loop-Mediated Isothermal Amplification Assay

등온 증폭법을 이용한 결핵균의 빠른 검출 시스템 개발
Author
Young-Chang Ahn, Youn-Hyoung Nam, Su-Min Park, Min-Ho Cho, Jae-Won Seo, Il-Kyu Yoon, Yong Hyun Park†, Won-Cheoul Jang*

안영창·남윤형·박수민·조민호·서재원·윤일규·박용현†·장원철*
Keywords
결핵, PCR, 등온증폭법, FIP(Forward Inner Primer), BIP(Back Inner Primer) , MTB(Mycobacterium Tuberculosis), PCR, LAMP(Loop Mediated Isothermal Amplification), FIP(Forward
Inner Primer), BIP(Back Inner Primer)
Abstract
결핵은 전 세계적으로 심각한 공중보건문제로 남아있다. 최근에는 결핵의 발병률이 증가하고 있는 추세이며 이에 따른 결핵의 정확한 조기치료와 심각한 부작용, 그리고 전염을 방지하기 위해서는 신속하고 정확한 결핵의 진단이 절실하게 필요하다. 본 연구에서는 결핵유전자를 빠르게 검출하는데 있어서 등온증폭법이 가지고 있는 높은 특이성과 신속성에 대하여 평가하였다. 결핵 DNA의 순차적 10배위 정량희석 DNA를 사용하였으며 일반PCR 방법과 등온증폭법의 실험방법의 검출한계, 민감성, 특이성, 재현성을 비교하였다. 그 결과 등온 증폭법은 빠른 증폭 시간과 높은 민감성, 높은 특이성을 가지고 있었으며 병원이나 연구실, 진단 검사실 등에서 결핵유전자를 빠르고 정확하게 진단할 수 있는 유용한 방법이 될 수 있을 것이다.

Mycobacterium tuberculosis (MTB) remains a major worldwide public health problem. In recent years, the incidence of MTB has been rising. Rapid and reliable diagnosis of Mycobacterium tuberculosis is essential to initiate correct treatment, avoid severe complications, and prevent transmission. LAMP was used to develop a rapid and sensitive laboratory diagnostic system for the MTB. In this research, the loop-mediated isothermal amplification method (LAMP) that amplifies DNA with high specificity and rapidity at an isothermal condition was evaluated for rapid detection of MTB. Undiluted DNA (2.10 × 106 copy/mL), 10-1, 10-2, 10-3, 10-4, 10-5 and 10-6 (copy/mL) of MTB DNA were amplified by PCR and LAMP to determine the sensitivity of the assay. At results, the LAMP assay reported here has the advantages of rapid amplification, high sensitivity, and high specificity and will be useful for rapid and reliable clinical diagnosis of MTB in hospital clinical laboratory.

Page
273 - 280
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